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在集落形成单位(CFU)检测中识别与定量造血祖细胞

MethoCult™ 是一系列半固态甲基纤维素培养基,专为促进造血祖细胞在培养中的最佳生长和分化而配制。MethoCult™ 是体外检测和定量造血祖细胞的"金标准",适用于 集落形成单位(CFU) 或细胞(CFC)测定,也称为甲基纤维素检测。特定配方还可用于人多能干细胞(hPSCs)或其他物种(如大鼠、非人灵长类和犬类)来源的造血细胞。

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为何使用 MethoCult™ ?

  • 采用严格筛选的组分制备。
  • 经过严格的性能测试,确保卓越的批次间一致性。
  • 提供即用型配方,可鉴定和计数总CFU、红系(CFU-E和BFU-E)、粒细胞/巨噬细胞(CFU-GM、CFU-G和CFU-M)以及混合系(CFU-GEMM)祖细胞。
  • 也提供允许研究人员自行添加所需组分的配方。可根据需求提供定制配方和规格。

MethoCult™ 人造血细胞培养基配方

含血清

规格:

  • 80-100 mL 瓶装
  • 3 mL × 24 管装

含血清:

含细胞因子:

可选择已添加或未添加重组细胞因子

组织

  • 脐带血
  • 骨髓
  • 外周血
  • 白细胞单采术样本
  • 纯化或培养的 HSPCs

应用

  • 快速 - 脐带血库快速CFU检测方案
  • 经典 - 历史方案原始配方
  • 优化 - 改进的髓系集落亚型区分度
  • 富集 - 适用于纯化/培养的HSPCs及LTC-IC检测
  • 支持髓系 (CFU-G/M/GM)、混合系 (CFU-GEMM) 和/或红系 (CFU-E/BFU-E) 集落生长

特点:

  • 配方可含或不含 EPO
  • 兼容 STEMvision™ 仪器,用于CFU检测的自动化标准化计数
  • 有能力验证 (Proficiency Testing) 方案

无血清

成分

80-100 mL 瓶装

含血清:

含细胞因子:

可选择已添加或未添加重组细胞因子

组织:

  • 脐带血
  • 骨髓
  • 外周血
  • 白细胞单采术样本
  • 纯化或培养的 HSPCs
  • hPSC 来源细胞

应用:

  • 适用于需要明确成分培养基的检测
  • 支持髓系 (CFU-G/M/GM) 集落生长,无论是否存在混合系 (CFU-GEMM) 集落

特点:

  • 完全无血清且成分明确
  • 配方可含或不含 EPO 或其他细胞因子

条件培养基

成分

  • 100 mL 瓶装

含血清:

含细胞因子:

可含或不含重组EPO的条件培养基

组织:

  • 脐带血
  • 骨髓
  • 外周血
  • 白细胞单采术样本
  • 纯化或培养的HSPCs

应用:

  • 使用琼脂-白细胞条件培养基 (Agar-LCM) 作为集落刺激因子来源的检测
  • 支持髓系(CFU-G/M/GM)、混合系(CFU-GEMM)和/或红系(CFU-E/BFU-E)集落生长

特点:

  • 含血清及补充成分
  • 配方可含或不含EPO

基础甲基纤维素

成分

40 mL 瓶装

含血清:

包含细胞因子:

组织:

  • 脐带血
  • 骨髓
  • 外周血
  • 白细胞单采术样本
  • 纯化或培养的HSPCs

应用:

不含血清、不含细胞因子的配方,适用于测试血清或细胞因子

特点:

  • 可灵活添加单一细胞因子和补充剂
  • 基础甲基纤维素2.6%母液,溶于Iscove改良杜氏培养基
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不确定哪种 MethoCult™ 配方适合您?

在CFU检测中获得强健的集落生长,最适MethoCult™配方取决于您的起始细胞来源。使用我们的交互式产品查找工具,确定最适合您实验的配方,并为您的CFU检测生成完整的材料清单。

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用于小鼠造血细胞及其他物种分离细胞的 MethoCult™ 培养基配方

含血清

MethoCult™ Serum-Containing

成分:

  • 90 mL 或 100 mL 瓶装
  • 3 ml × 24 管装

含血清:

包含细胞因子:

可选择已添加或未添加重组细胞因子

组织:

  • 骨髓
  • 外周血
  • 脾脏
  • 胎肝

应用:

支持髓系 (CFU-G/M/GM)、混合系 (CFU-GEMM) 和/或红系 (CFU-E/BFU-E) 祖细胞的集落生长

特点:

  • 配方可含或不含 EPO
  • 选择与 STEMvision™ 仪器兼容的配方,实现CFU检测的自动化标准化计数

无血清

MethoCult™ Serum-Free

成分:

100 mL 瓶装

含血清:

含细胞因子:

已添加重组细胞因子

组织:

  • 骨髓
  • 外周血
  • 脾脏
  • 肝脏

应用:

支持红系 (BFU-E) 祖细胞的集落生长

特点:

  • 含 EPO 配方
  • 兼容 STEMvision™ 仪器,用于 CFU 检测的自动化标准化计数

基础甲基纤维素

MethoCult™ Base Methylcellulose

成分:

80 mL 或 40 mL 瓶装

含血清:

含细胞因子:

组织:

  • 骨髓
  • 外周血
  • 脾脏
  • 胎肝

应用:

不含血清、不含细胞因子的配方,适用于测试血清或细胞因子

特点:

  • 可灵活添加单一细胞因子和补充剂
  • 基础甲基纤维素2.6%母液,溶于 Iscove 改良杜氏培养基

其他物种

成分:

100 mL瓶装

含血清:

含细胞因子:

已添加重组细胞因子

组织:

  • 骨髓
  • 非人灵长类动物骨髓、外周血及纯化 HSPCs

应用:

  • 大鼠髓系 (CFU-GM/G/M) 或红系 (CFU-E/BFU-E) 祖细胞定量
  • 非人灵长类动物髓系(CFU-GM)、混合系 (CFU-GEMM) 和/或红系 (CFU-E/BFU-E) 祖细胞定量

特点:

  • 大鼠GF R3774配方专为检测大鼠粒细胞/巨噬细胞祖细胞优化
  • 小鼠SF M3436配方适用于大鼠红系祖细胞的生长与计数
  • 多款人用经典、优化及富集配方适用于非人灵长类动物样本
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实验数据

Human Cord Blood Colonies Plated in MethoCult™ Optimum H4034, Imaged on STEMvision™ Instrument

图1所示。人类脐带血菌落镀MethoCult™Optimum H4034,影像来源:STEMvision™工具

Mouse Bone Marrow Colonies Plated in MethoCult™ GF M3434, Imaged on STEMvision™ Instrument

图2。小鼠骨髓菌落镀于MethoCult™GF M3434,影像来源:STEMvision™工具


STEMvision™ CFU Counting Instrument

自动化与标准化 CFU 检测计数

采用 STEMvision™ 确保 CFU 检测结果准确可重复,该台式仪器与计算机系统可实现造血集落自动化成像与计数。

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品牌历史

STEMCELL 与 MethoCult™ 均源自不列颠哥伦比亚癌症局Terry Fox 血液学/肿瘤学研究实验室的培养基制备服务。如今二十多年过去,MethoCult™已成为造血祖细胞集落形成实验中发表文献最多的甲基纤维素培养基。

CFU 检测资源

探索我们的资源,获取关于建立、优化和标准化CFU检测的信息与支持。


关键应用及相关刊物

研究内源性及外源性调控因子对正常造血祖细胞增殖分化的影响

申杰等(2014)高c-Kit表达可识别自我更新受损和巨核细胞偏向的造血干细胞。中华检验医学杂志,2011,31 (2):557 - 557
Zimdahl B等人(2014)Lis1调节造血干细胞和白血病的不对称分裂。生态学报,46(3):245-52
Baker S等人(2014)B-myb是造血干细胞和骨髓祖细胞发育的重要调节因子。科学通报,31 (8):322 - 322

研究内源性及外源性调控因子对恶性造血祖细胞增殖分化的影响

冻存、细胞处理和体外操作程序的质量控制

测试造血祖细胞对候选治疗药物的体外敏感性(用于药物开发)

评价诱导多能干细胞的造血分化

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