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StemSpan™ T细胞生成试剂盒

将人CD34+造血祖细胞扩增并分化为T细胞的全套试剂盒
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产品号 #09940_C

将人CD34+造血祖细胞扩增并分化为T细胞

产品组分包括

  • StemSpan™ SFEM II培养基，2 x 100 mL
  • StemSpan™淋系祖细胞扩增添加物（10X），5 mL
  • StemSpan™淋系祖细胞分化包板材料（100X），2 x 0.25 mL
  • StemSpan™T细胞祖细胞成熟添加物（10X），12.5 mL
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采用两阶段的分化方法，可从起始的人脐带血（CB）CD34+细胞稳定扩增出数千个CD4+CD8+双阳性（DP）T细胞。

第一阶段中，CB CD34+细胞在含扩增添加物的培养基中培养14天，促进其增殖并分化为CD7+CD5+ T祖细胞。第二阶段中，将前14天生成的T祖细胞在含成熟添加物的培养基中继续培养4周，促使其成熟为DP细胞。该培养基试剂盒无血清且无需饲养层，消除了血清和基质细胞系引入的不稳定因素。

所有试剂盒组分可单独购买以方便您的使用。StemSpan™淋系祖细胞扩增添加物（10X）包含重组人细胞因子组合和其他添加剂，专用于选择性促进从人脐带血（CB）或骨髓（BM）样本中分离的CD34+细胞扩增及分化为CD7+CD5+ T祖细胞（pro-T）。此外，StemSpan™ T细胞祖细胞成熟添加物（10X）能进一步促使T祖细胞成熟为DP细胞，以及在进一步的刺激条件下支持DP细胞成熟为CD8单阳性（SP）T细胞。StemSpan™淋系祖细胞扩增添加物（10X）和StemSpan™ T细胞祖细胞成熟添加物（10X）需与StemSpan™ SFEM II培养基以及用StemSpan™淋系分化包板材料（100X）包被的培养板搭配使用。

可选的将DP细胞进一步成熟为CD8 SP T细胞的延长实验方法需要使用由StemSpan™ T细胞生成试剂盒所含试剂配制的完全T细胞祖细胞成熟培养基，并需要搭配使用ImmunoCult™ CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂和IL-15。

第一阶段中，CB CD34+细胞在含扩增添加物的培养基中培养14天，促进其增殖并分化为CD7+CD5+ T祖细胞。第二阶段中，将前14天生成的T祖细胞在含成熟添加物的培养基中继续培养4周，促使其成熟为DP细胞。该培养基试剂盒无血清且无需饲养层，消除了血清和基质细胞系引入的不稳定因素。

所有试剂盒组分可单独购买以方便您的使用。StemSpan™淋系祖细胞扩增添加物（10X）包含重组人细胞因子组合和其他添加剂，专用于选择性促进从人脐带血（CB）或骨髓（BM）样本中分离的CD34+细胞扩增及分化为CD7+CD5+ T祖细胞（pro-T）。此外，StemSpan™ T细胞祖细胞成熟添加物（10X）能进一步促使T祖细胞成熟为DP细胞，以及在进一步的刺激条件下支持DP细胞成熟为CD8单阳性（SP）T细胞。StemSpan™淋系祖细胞扩增添加物（10X）和StemSpan™ T细胞祖细胞成熟添加物（10X）需与StemSpan™ SFEM II培养基以及用StemSpan™淋系分化包板材料（100X）包被的培养板搭配使用。

可选的将DP细胞进一步成熟为CD8 SP T细胞的延长实验方法需要使用由StemSpan™ T细胞生成试剂盒所含试剂配制的完全T细胞祖细胞成熟培养基，并需要搭配使用ImmunoCult™ CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂和IL-15。

第一阶段中，CB CD34+细胞在含扩增添加物的培养基中培养14天，促进其增殖并分化为CD7+CD5+ T祖细胞。第二阶段中，将前14天生成的T祖细胞在含成熟添加物的培养基中继续培养4周，促使其成熟为DP细胞。该培养基试剂盒无血清且无需饲养层，消除了血清和基质细胞系引入的不稳定因素。

所有试剂盒组分可单独购买以方便您的使用。StemSpan™淋系祖细胞扩增添加物（10X）包含重组人细胞因子组合和其他添加剂，专用于选择性促进从人脐带血（CB）或骨髓（BM）样本中分离的CD34+细胞扩增及分化为CD7+CD5+ T祖细胞（pro-T）。此外，StemSpan™ T细胞祖细胞成熟添加物（10X）能进一步促使T祖细胞成熟为DP细胞，以及在进一步的刺激条件下支持DP细胞成熟为CD8单阳性（SP）T细胞。StemSpan™淋系祖细胞扩增添加物（10X）和StemSpan™ T细胞祖细胞成熟添加物（10X）需与StemSpan™ SFEM II培养基以及用StemSpan™淋系分化包板材料（100X）包被的培养板搭配使用。

可选的将DP细胞进一步成熟为CD8 SP T细胞的延长实验方法需要使用由StemSpan™ T细胞生成试剂盒所含试剂配制的完全T细胞祖细胞成熟培养基，并需要搭配使用ImmunoCult™ CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂和IL-15。

第一阶段中，CB CD34+细胞在含扩增添加物的培养基中培养14天，促进其增殖并分化为CD7+CD5+ T祖细胞。第二阶段中，将前14天生成的T祖细胞在含成熟添加物的培养基中继续培养4周，促使其成熟为DP细胞。该培养基试剂盒无血清且无需饲养层，消除了血清和基质细胞系引入的不稳定因素。

所有试剂盒组分可单独购买以方便您的使用。StemSpan™淋系祖细胞扩增添加物（10X）包含重组人细胞因子组合和其他添加剂，专用于选择性促进从人脐带血（CB）或骨髓（BM）样本中分离的CD34+细胞扩增及分化为CD7+CD5+ T祖细胞（pro-T）。此外，StemSpan™ T细胞祖细胞成熟添加物（10X）能进一步促使T祖细胞成熟为DP细胞，以及在进一步的刺激条件下支持DP细胞成熟为CD8单阳性（SP）T细胞。StemSpan™淋系祖细胞扩增添加物（10X）和StemSpan™ T细胞祖细胞成熟添加物（10X）需与StemSpan™ SFEM II培养基以及用StemSpan™淋系分化包板材料（100X）包被的培养板搭配使用。

可选的将DP细胞进一步成熟为CD8 SP T细胞的延长实验方法需要使用由StemSpan™ T细胞生成试剂盒所含试剂配制的完全T细胞祖细胞成熟培养基，并需要搭配使用ImmunoCult™ CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂和IL-15。

亚型
专用培养基，添加剂
 
细胞类型
造血干/祖细胞，T 细胞
 
种属
人
 
应用
细胞培养，分化，扩增
 
品牌
StemSpan
 
研究领域
癌症，免疫，干细胞生物学，细胞治疗开发
 
制剂类别
无血清
 

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实验数据

Figure 1. Frequency and Yield of CD7+CD5+ Pro-T Cells After 14 Days of Culture

CB-derived CD34+ cells (freshly isolated or frozen) were cultured for 14 days in StemSpan™ SFEM II containing Lymphoid Progenitor Expansion Supplement (Catalog #09915) on plates coated with Lymphoid Differentiation Coating Material (Catalog #09925). Cells were harvested and analyzed for CD7 and CD5 expression by (A) flow cytometry. The (B) average frequency of viable CD7+CD5+ pro-T cells on day 14 was 70%, with ~200 CD7+CD5+ cells produced per input CD34+ cell. Shown are means with 95% confidence intervals (n = 33).

Figure 2. Frequency and Yield of CD4 ISP and CD4+CD8+ DP Cells After 42 Days of Culture

CB-derived CD34+ cells (freshly isolated or frozen) were cultured with the StemSpan™ T Cell Generation Kit (Catalog #09940) for 42 days and (A) analysed by flow cytometry for the expression of CD4, CD8, CD3 and TCRαβ. The (B) frequency and (C) yield of CD4 ISP, double-positive (CD4+CD8+) and CD3+TCRαβ+-expressing double-positive cells (CD4+CD8+CD3+TCRαβ+) are shown. On average, 38% of the total viable population were DP (CD4+CD8+), of which 35% co-expressed CD3 and TCRαβ. The yields of total DP cells and CD3+TCRαβ+ DP cells per input CD34+ cell were ~23,000 and ~9,000, respectively. Shown are means with 95% confidence intervals (n = 31).

Figure 3. Frequency and Yield of CD8 SP T Cells After 49 Days of Culture

DP cells were further matured into CD8 SP T cells by culturing for an additional 7 days in StemSpan™ SFEM II with T Cell Progenitor Maturation Supplement (Catalog #09930), IL-15 (Catalog #78031) and ImmunoCult™ CD3/CD28/CD2 T Cell Activator (Catalog #10970) on coated plates. On day 49, cells were (A) analyzed by flow cytometry for the expression of CD3, TCRαβ, CD4 and CD8. The (B) frequency and yield of CD3+TCRαβ+-expressing cells and their subsets are shown. On average, 54% of the CD3+TCRαβ+ cells were DP (CD4+CD8+) and 38% were CD8 SP (CD4-CD8+). The average yield of CD8 SP T cells per input CD34+ cell was ~6,000. CD3+TCRαβ+ CD4 SP (CD4+CD8-) T cells were detected at very low frequencies (data not shown). Shown are means with 95% confidence intervals (n = 12).

产品说明书及文档

请在《产品说明书》中查找相关支持信息和使用说明，或浏览下方更多实验方案。

Document Type
Product Name
Catalog #
Lot #
Language
Document Type
Product Information Sheet
Product Name
StemSpan™ T Cell Generation Kit
Catalog #
09940
Lot #
All
Language
English
Document Type
Technical Manual
Product Name
StemSpan™ T Cell Generation Kit
Catalog #
09940
Lot #
All
Language
English
Document Type
Safety Data Sheet 1
Product Name
StemSpan™ T Cell Generation Kit
Catalog #
09940
Lot #
All
Language
English
Document Type
Safety Data Sheet 2
Product Name
StemSpan™ T Cell Generation Kit
Catalog #
09940
Lot #
All
Language
English
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Safety Data Sheet 3
Product Name
StemSpan™ T Cell Generation Kit
Catalog #
09940
Lot #
All
Language
English
Document Type
Safety Data Sheet 4
Product Name
StemSpan™ T Cell Generation Kit
Catalog #
09940
Lot #
All
Language
English

应用领域

本产品专为以下研究领域设计，适用于工作流程中的高亮阶段。探索这些工作流程，了解更多我们为各研究领域提供的其他配套产品。

Research Area
Workflow Stages

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种属 Human
配方类别 Serum-Free
质量保证:

产品仅供研究使用，不用于针对人或动物的诊断或治疗。 欲获悉更多关于STEMCELL的质控信息，请访问 STEMCELL.CN/COMPLIANCE.
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