传统的人胚胎干细胞（ES）和诱导多能干细胞（iPS）传代需要在显微镜下手动分离未分化的集落，或者使用胶原酶或分散酶将集落部分解离为团块。手动分离方法耗时耗力，同时在使用酶解离时必须确保酶被灭活或充分稀释，以防止在随后的传代中团块难以贴壁或存活率降低。

使用新的（GCDR）即可避免上述的所有难点。GCDR为无酶、无动物源成分，及化学成分确定的溶液。人ES和iPS细胞被解离为团块后无需进行洗涤或离心，且可大量扩增（12-40倍）。以下是一些使用GCDR时需要注意的事项：

• GCDR孵育时间：对于使用mTeSR™1、TeSR™-E8™或TeSR™2培养基和基质胶Matrigel™培养的细胞，GCDR室温孵育6-8分钟。对于使用mTeSR™1、TeSR™-E8™或TeSR™2培养基和基质胶Vitronectin XF™培养的细胞，GCDR室温孵育6-12分钟。对于使用mTeSR™ Plus和基质胶Corning® Matrigel®培养的细胞，GCDR室温孵育8-10分钟。对于使用mTeSR™ Plus和基质胶Vitronectin XF™培养的细胞，GCDR室温孵育8-12分钟。对于其他的基质胶或培养基，孵育时间可能不同，需要使用者进行优化。请注意对于不同的细胞系或者使用不同的无酶细胞传代试剂，孵育时间也会有所不同。
• 集落被解离为合适大小的团块后，无需通过离心洗掉GCDR。细胞团块可以直接铺于基质胶包被的培养板上。
• 可在初期传代时尝试不同的传代比例，来决定最佳的传代密度。

更多信息，包括使用GCDR进行人ES和iPS细胞传代的详细步骤以及这些培养物的形态，请参阅。

除了用于ES和iPS细胞团块传代外，还可以通过GCDR以无酶方式得到单细胞悬浮液。这两种使用方式的区别在于孵育温度和解离时间。为了得到用于下游分化实验的单细胞，我们建议细胞在GCDR中37℃孵育8-10分钟（而不是团块传代建议的室温孵育6-8分钟）。我们还建议在制备ESC/iPSC的单细胞悬液时加入。得到的单细胞可使用将其成功分化为定型内胚层（DE）细胞。

如对GCDR的使用有问题，请通过techsupport.cn@stemcell.com联系我们。

您可能对另一个无酶解离试剂也有兴趣，此试剂也可用于人多能干细胞（hPSCs）团块传代。更多信息请参考此篇。