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从非常规样本中分离细胞

从非常规样本中分离细胞

STEMCELL提供多种细胞分选试剂盒,用于从各种来源的样本分离多种不同类型的细胞。如果您的研究需要使用来源于非常规样本的细胞(即我们的现有试剂盒没有适配的组织样本),可参考以下技术窍门,帮您更高效地分离细胞。

制备单细胞悬液:

在处理实体组织时,获得单细胞悬液是细胞分选开始之前非常必要的一步,并且尤其值得注意的是,您使用的组织处理方法不能干扰到细胞表位。Worthington组织消化指南及已发表文献中的实验方法是制备单细胞悬液过程中可借鉴的技术资源。

当细胞处于悬浮状态时,请加入(产品号 #07900)最大化的减少细胞团快,特别是在处理预先冻存的样本或者使用酶解离的组织时,这一点非常重要。欲了解使用DNase I具体的操作步骤,请查看我们的技术窍门:使用DNase I处理成团的细胞悬浮液

接着,使用
37 µm的细胞过滤器(产品号 #27250)来过滤细胞悬液,以进一步去除细胞团块及碎片,这一步对提高细胞分选的效率十分重要。

某些情况下,还需要在细胞分选前去除不需要的细胞群。比如使用密度梯度离心液进行离心,如Lymphoprep™(产品号 #07801/07851),去除不需要的粒细胞和红细胞(RBCs)。或者使用氯化铵溶液(产品号 #07800/07850)裂解RBC。

正选或负选

正选(目的细胞被标记)或负选(非目的细胞被标记)方法的选择取决于您目的细胞的下游应用或检测。

正选:

当处理非常规样本时,我们建议首选正选的分离方法。若已有明确的细胞表面标记物,STEMCELL可提供多种正选试剂盒:

  1. STEMCELL提供支持多种不同的细胞外标记物的正选试剂盒,以用于各种样本来源。点击这里查看。
  2. 若没有现成的试剂盒,可以联系info.cn@stemcell.com,定制适合您研究目的的正选试剂盒。
  3. 您还可以使用EasySep™人Do-It-Yourself正选试剂盒II(产品号 #17699)从人特殊样本分选细胞;若您目的细胞的细胞表面标记物可被小鼠IgG1抗体所识别,您可使用EasySep™ Do-It-Yourself正选试剂盒II(产品号 #17698)从其它物种分离细胞。
  4. 若针对目的细胞表面标记物的抗体能与生物素、FITC、PE和APC结合,您也可以使用我们的EasySep™间接正选试剂盒。点击这里,查看STEMCELL提供的所有间接分选试剂盒。


负选(富集):

若您需要得到未被标记的细胞,为了确保最佳的富集效果,就必须先通过流式分析评估起始样本细胞群的比例和类型,尤其是目的细胞和需要去除的细胞的比例。常见的细胞类型包括:T细胞、B细胞、NK细胞、单核细胞、粒细胞、树突状细胞和上皮细胞。STEMCELL也为您的非常规样本的负选操作提供多种方案:

  1. 根据您起始样本的细胞组成,选择与之相匹配的富集试剂盒。点击这里,查看STEMCELL所有富集试剂盒。
  2. 通过info.cn@stemcell.com与我们联系,我们的技术人员可以帮助您定制适用于您特殊需求的富集试剂盒。
  3. 若您需要从特殊的小鼠样本分选细胞,可以通过将生物素化抗体与EasySep™小鼠Streptavidin RapidSpheres™分选试剂盒结合的方法来分离目的细胞。请注意,该试剂盒不适用于那些已通过氯化铵裂解了RBC的样本。

若您需要了解更多的信息,或为您的研究定制特殊的分选试剂盒,请通过info.cn@stemcell.com与我们联系。
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