（产品号 #05835/05839）和（产品号 #08581/08582）是成分确定且无血清的培养基，可高效稳定地将人多能干细胞（hPSCs）诱导为神经祖细胞（NPCs)。此培养基可兼容EB法和单层培养法进行神经诱导。

EB法：

STEMdiff™神经诱导培养基和STEMdiff™ SMADi神经诱导试剂盒可将hPSCs高效地分化为神经玫瑰花环。（产品号 # 05832）可选择性的解离神经花环结构以得到高纯度的NPCs。优化实验开始后的每一个步骤可得到更好的分化结果。以下是使用EB法成功进行神经诱导的一些要点：

• 如实验开始于饲养层上培养的hPSCs，最好在进行神经分化前，先使用以下产品将hPSCs转入无饲养层体系：（产品号 #85850）和基质胶Corning® Matrigel® hESC-Qualified Matrix（Corning产品号 #354277）或基质胶（产品号 #07180）。
• 使用高质量的hPSCs作为起始样本非常重要：起始样本中形态上出现分化的集落不超过10%，且细胞应处于指数生长期。
• 在首次尝试此实验方法时使用对照细胞系。经过测试，在我们的技术手册中列举的以下细胞系可做为对照组：H1、H7、H9、WLS-1C和WLS-4D1。
• 使用AggreWell™800（产品号 #34811）培养板进行实验，因为使用大细胞团块可更高效的在后续实验中分离NPC。
• STEMdiff™神经花环挑选试剂的孵育时间不宜过长，也不宜在分离神经花环结构时，用DMEM/F-12过度冲洗培养板，以免同时分离出扁平细胞（神经嵴细胞）。
• 培养基使用前需预热，避免在您的细胞上添加刚从冰箱中取出的冷藏培养基。
• 使用我们的（产品号 #69001），通过免疫细胞化学确定神经诱导效率：
• PAX6抗体（早期神经祖细胞标志物）
• SOX-1抗体（神经祖细胞标志物）
• Nestin抗体（神经细胞标志物）
• OCT4/OCT3抗体（未分化的hPSC标志物）
• 其他可有效鉴定神经花环形成的标志物包括：
• ZO-1（细胞紧密粘连标志物，在神经花环空腔中表达）
• SOX-10（在神经花环周围的扁平神经嵴细胞中表达）

如需其他关于鉴定hPSC诱导的神经祖细胞的信息，请参考此篇技术窍门。通过STEMdiff™神经诱导培养基得到的NPCs具有功能且可分化为成熟的神经和胶质细胞。如需更多关于诱导NPCs的下游应用信息，请参考此篇宣传单页。

单层培养法：

使用STEMdiff™神经诱导培养基和STEMdiff™ SMADi神经诱导试剂盒，通过单层培养法诱导神经祖细胞的关键点请参考此篇技术窍门.。

单层培养法操作简单且用时较短（PAX6+ NPCs可在6-9天生成），但必须使用细胞标志物来进行鉴定（细胞形态不总是可靠的指标）。EB法诱导效率高，不仅在多篇文献中使用，且肉眼即可分辨神经花环结构是否形成。另外，通过挑选神经花环结构和去除扁平的神经嵴细胞也可高效富集中枢类型的NPCs。



如需更多信息和帮助，请联系techsupport.cn@stemcell.com。