人IgE ELISpot抗体配对试剂盒

用于检测和计数分泌人免疫球蛋白E的细胞

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用于检测和计数分泌人免疫球蛋白E的细胞

产品优势

高效且灵敏度高：可在单细胞水平检测抗原特异性免疫反应；
可控性与灵活性：提供完整的包被流程控制，可同时筛选多种条件和/或免疫球蛋白；
多功能性：适用于新鲜或冻存的PBMC。

产品组分包括

抗人IgE单克隆抗体(107)，未标记；
抗人IgE单克隆抗体(107/182/101)，生物素标记；
ELISpot专用链霉亲和素-ALP；
抗人CD40单克隆抗体(S2C6)，激活剂；
重组人IL-4，冻干。

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总览

人免疫球蛋白E（IgE）ELISpot抗体配对试剂盒旨在为希望灵活设置ELISpot检测方案的用户提供便利。该试剂盒用于定量检测和计数外周血单个核细胞（PBMCs）悬液中分泌人IgE的细胞。ELISpot常用于评估免疫反应，如确定循环抗体分泌细胞（ASCs）的占比和亚型。可溶性IgE由IgE+ ASCs分泌，有助于宿主抵御寄生虫感染以及过敏反应。ELISpot具有高灵敏度，可在单细胞水平检测分泌的分析物。该检测方法广泛用于过敏、传染病和疫苗研究。

该检测基于改良的夹心ELISA方法，即将细胞加入预包被有特异性免疫球蛋白捕获抗体的ELISpot板中。在整个细胞培养期间，分泌的免疫球蛋白会被捕获，随后细胞被洗去。通过加入生物素标记的检测抗体检测捕获的免疫球蛋白，随后加入SA-ALP与生物素标记抗体结合。加入显色酶底物5-溴-4-氯-3-吲哚基-1-磷酸酯（BCIP）/硝基蓝四唑（NBT）后，会形成有色斑点。这些斑点的数量、大小和强度与样品中分泌IgE的细胞总数及分泌的免疫球蛋白量成正比。

注意：该试剂盒包含足量试剂用于4块96孔ELISpot板。ELISpot板（如Millipore Sigma产品号#MSIPS4W10/MAIPSWU10）和BCIP/NBT底物（如产品号#200-1016）为使用该试剂盒所必需，需单独购买。

该试剂盒包含两个包装盒（产品号#200-1008/200-1009）。

实验数据

Figure 1. Human IgE ELISpot Antibody Pair Kit Detects Total IgE+ Antibody-Secreting Cells.

ELISpot analysis of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) isolated from whole blood using EasySep™ Direct Human PBMC Isolation Kit (Catalog #19654) and cultured in RPMI 1640 Medium (Catalog #36750) supplemented with 2 mM L-glutamine (Catalog #07100) and 10% Fetal Bovine Serum (Catalog #100-0180). Cells were pre-activated with Anti-human CD40 mAb (S2C6), activator + Recombinant human IL-4, lyophilized (included in kit) or in the absence of stimuli (negative control) at 37°C, 5% CO2 for 5 days. Cells were then seeded at 2 x 10^5 cells/well on ELISpot plates pre-coated with Anti-human IgE mAb (107), unconjugated and incubated for a further 20 hours. Following incubation, ELISpot plates were processed as per the instructions on the Product Information Sheet. Wells were imaged and counted using an ELISpot reader.

产品说明书及文档

请在《产品说明书》中查找相关支持信息和使用说明，或浏览下方更多实验方案。

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Human IgE ELISpot Antibody Pair Kit

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