人IgG1 ELISpot抗体配对试剂盒

用于检测和计数分泌人免疫球蛋白G1的细胞

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用于检测和计数分泌人免疫球蛋白G1的细胞

产品优势

高效且灵敏度高：可在单细胞水平检测抗原特异性免疫反应；
可控性与灵活性：提供完整的包被流程控制，可同时筛选多种条件和/或免疫球蛋白；
多功能性：适用于新鲜或冻存PBMC。

产品组分包括

抗人IgG单克隆抗体(MT145)，未标记；
抗人IgG1单克隆抗体(MTG1218)，生物素标记；
ELISpot专用链霉亲和素-ALP；
R848，激活剂；
重组人IL-2，冻干。

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要查看实验方案所需的所有配套产品，请参阅《实验方案与技术文档》。

BCIP/NBT ELISpot底物

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实验数据

产品说明书及文档

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人免疫球蛋白G1（IgG1）ELISpot抗体配对试剂盒旨在为希望灵活设置ELISpot检测方案的用户提供便利。该试剂盒用于检测和计数外周血单个核细胞（PBMCs）悬液中分泌人IgG1的细胞。ELISpot检测常用于评估特异性免疫反应，如循环抗原特异性记忆B细胞或抗体分泌细胞（ASCs）的占比和同种型或亚型。IgG1与针对蛋白和多糖抗原的免疫反应相关。ELISpot具有高灵敏度，可在单细胞水平检测分泌的分析物。该检测方法广泛用于传染病和疫苗研究。

该检测可定量抗原特异性和/或总IgG1分泌细胞。检测基于改良的夹心ELISA方法，将细胞加入预包被目标抗原或人IgG特异性捕获抗体的ELISpot板中。在整个细胞培养期间，细胞分泌的IgG1被捕获，然后洗去细胞。通过加入IgG1亚类特异性生物素标记的检测抗体来检测捕获的IgG1，然后加入SA-ALP与生物素标记的抗体结合。加入显色酶底物5-溴-4-氯-3-吲哚基-1-磷酸（BCIP）/硝基蓝四唑（NBT）后，会形成有色斑点。这些斑点的数量、大小和强度与样本中抗原特异性或总IgG1分泌细胞的占比及分泌的分析物量成正比。

注意：该试剂盒包含足量试剂用于4块96孔ELISpot板。ELISpot板（如Millipore Sigma产品号#MSIPS4W10/MAIPSWU10）和BCIP/NBT底物（产品号#200-1016）为使用该试剂盒所必需，需单独购买。检测抗原特异性免疫反应时还需提供目标抗原。

本试剂盒包含两个包装盒（产品号#200-1008/200-1009）。

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实验数据

Figure 1. Human IgG1 ELISpot Antibody Pair Kit Detects Total IgG1+ Antibody-Secreting Cells.

ELISpot analysis of peripheral blood mononuclear cells pre-activated with R848, Activator + Recombinant human IL-2, lyophilized (included in kit) or in the absence of stimuli (negative control) at 37°C, 5% CO2 for 72 hours. Cells were then seeded at 1 x 10^5 cells/well on ELISpot plates pre-coated with Anti-human IgG mAb (MT145), unconjugated and incubated again overnight. Following incubation, ELISpot plates were processed as per the instructions on the Product Information Sheet for detecting total IgG1. Wells were imaged and counted using an ELISpot reader.