人IgG3 ELISpot抗体对试剂盒

用于检测和计数分泌人免疫球蛋白G3的细胞

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用于检测和计数分泌人免疫球蛋白G3的细胞

产品优势

高效且高灵敏度：可在单细胞水平检测抗原特异性免疫反应；
完整对照与灵活性：提供完整的包被流程对照，可同时筛选多种条件和/或免疫球蛋白；
多适配性：适用于新鲜或冻存PBMC。

产品组分包括

抗人IgG单克隆抗体(MT145)，未标记；
抗人IgG3单克隆抗体(MTG34)，生物素标记；
ELISpot专用链霉亲和素-ALP；
R848，活化剂；
重组人IL-2，冻干。

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要查看实验方案所需的所有配套产品，请参阅《实验方案与技术文档》。

BCIP/NBT ELISpot底物

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实验数据

产品说明书及文档

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人免疫球蛋白G3（IgG3）ELISpot抗体对试剂盒旨在为计划自行建立更具有灵活性的ELISpot检测的用户提供便利。本试剂盒用于检测和计数外周血单个核细胞（PBMCs）悬液中分泌人IgG3的细胞。ELISpot常用于评估特异性免疫反应，如循环抗原特异性记忆B细胞或抗体分泌细胞（ASCs）的占比和同种型或亚类。IgG3主要与机体对病毒感染的免疫反应相关。ELISpot具有高灵敏度，可在单细胞水平检测分泌的分析物。该检测用于传染病和疫苗研究。

本检测可定量抗原特异性和/或总IgG3分泌细胞。本检测基于改良的夹心ELISA方法，将细胞加入预包被有目标抗原或人IgG特异捕获抗体的ELISpot板中。分泌的IgG3在整个培养期间被捕获，然后细胞被洗去。通过加入IgG3亚类特异生物素化检测试剂抗体检测捕获的IgG3，然后加入SA-ALP与生物素化抗体结合。加入显色酶底物5-溴-4-氯-3-吲哚基-1-磷酸（BCIP）/硝基蓝四唑（NBT）后形成有色斑点。这些斑点的数量、大小和强度与样品中抗原特异性或总IgG3分泌细胞的占比及分泌的分析物量成正比。

注意：本试剂盒包含足量试剂用于4块96孔ELISpot板。ELISpot板（如Millipore Sigma产品号#MSIPS4W10/MAIPSWU10）和BCIP/NBT底物（产品号#200-1016）为使用本试剂盒所必需，需单独购买。检测抗原特异性免疫反应时还需自备目标抗原。

本试剂盒以两个盒装形式售卖（产品号#200-1019/200-1020）。

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实验数据

Figure 1. Human IgG3 ELISpot Antibody Pair Kit Detects Total IgG3+ Antibody-Secreting Cells.

ELISpot analysis of peripheral blood mononuclear cells pre-activated with R848, Activator + Recombinant human IL-2, lyophilized (included in kit) or in the absence of stimuli (negative control) at 37°C, 5% CO2 for 72 hours. Cells were then seeded at 5 x 10^4 cells/well (R848 + IL-2) or 1 x 10^5 cells/well (no stimuli) on ELISpot plates pre-coated with Anti-human IgG mAb (MT145), unconjugated and incubated again overnight. Following incubation, ELISpot plates were processed as per the instructions on the Product Information Sheet for detecting total IgG3. Wells were imaged and counted using an ELISpot reader.